2008/12/19
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中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
出口禽肉中莫能菌素殘留量檢驗(yàn)方法
生物自顯影法 SN 0296一93
Method for the determination of monensin
residues in poultry meat for export
?Bioautography method
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1 主題內(nèi)容與適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了出口禽肉中莫能菌素殘留量的抽樣、制樣和生物自顯影測(cè)定法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于出口凍雞中莫能菌素殘留量的檢驗(yàn)。
2 抽樣和制樣
2.1 檢驗(yàn)批
以不超過(guò)2500件商品為一檢驗(yàn)批。
同一檢驗(yàn)批的商品應(yīng)具有相同特征,如包裝、標(biāo)記、產(chǎn)地、規(guī)格和等級(jí)等。
2.2 抽樣數(shù)量
批量,件 zui低抽樣數(shù),件
1～25 1
26～100 5
101～250 10
251～500 15
501～1000 17
1001～2500 20
2.3 抽樣方法
按2.2規(guī)定的抽樣件數(shù)隨機(jī)抽取,逐件開(kāi)啟。每件至少取一袋作為原始樣品,原始樣
品總量不少于2kg,放入清潔容器內(nèi),加封后標(biāo)明標(biāo)記,及時(shí)送交實(shí)驗(yàn)室。
2.4 樣品制備
從每袋原始樣品中取出部分有代表性樣品,將可食部分放入高速組織搗碎機(jī)中搗碎均
勻,充分混勻,用四分法縮分出不少于1kg試樣。裝入清潔容器內(nèi),加封后標(biāo)明標(biāo)記。
2.5 樣品保存
將試樣于?18℃冷凍保存。
注：在抽樣及制樣過(guò)程中,必須防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。
3 測(cè)定方法
3.1 方法提要
用甲醇提取肉樣中莫能菌素,經(jīng)四氯化碳萃取后濃縮至干,以甲醇溶解殘留物,用薄
層分離,再用生物自顯影法測(cè)定。
3.2 設(shè)備和材料
3.2.1 微量注射器：50 μL。
3.2.2 薄層板：硅膠,Q/YT 257?85SG,5cm×20cm,使用前110℃活化2h。
3.2.3 展開(kāi)缸：240mm×57mm×32mm。
3.2.4 游標(biāo)卡尺：測(cè)量范圍0～200mm,精度0.02mm或使用抑菌圈測(cè)量?jī)x測(cè)量。
3.2.5 離心機(jī)：轉(zhuǎn)速3000 r/min。
3.2.6 旋轉(zhuǎn)濃縮器。
3.2.7 恒溫培養(yǎng)箱：37±1℃。
3.2.8 高壓滅菌器。
3.2.9 長(zhǎng)方形培養(yǎng)皿：20cm×10cm×5cm。
3.2.10 均質(zhì)器：帶均質(zhì)杯250mL。
3.3 試劑和培養(yǎng)基
3.3.1 試劑
3.3.1.1 甲醇：分析純。
3.3.1.2 四氯化碳：分析純。
3.3.1.3 乙酸乙酯: 分析純。
3.3.1.4 莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)品: 960μg（效價(jià)）/mg（中國(guó)獸藥監(jiān)察所提供）。
3.3.1.5 試驗(yàn)菌種：枯草桿菌（Bacillus subtilis）, 菌種號(hào)ATCC 6633（衛(wèi)生部藥品生物
制品檢定所提供）。
3.3.2 培養(yǎng)基
3.3.2.1 菌種用培養(yǎng)基（見(jiàn)附錄A 第A1章）。
3.3.2.2 生物自顯影用培養(yǎng)基（見(jiàn)附錄A第A2章）。
3.3.2.3 肉湯培養(yǎng)基（見(jiàn)附錄A第A3章）。
3.4 測(cè)定步驟
3.4.1 工作液制備
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